Тест на ВИЧ позволяет выяснить, присутствует ли вирус иммунодефицита человека, его антигены или антитела к белкам ВИЧ в крови, моче или слюне [1] . Анализом на вирусную нагрузку называется определение количества копий РНК вируса иммунодефицита человека в миллилитре плазмы крови, которое позволяет судить о стадии заболевания и эффективности антиретровирусной терапии [2] [3] .

Содержание

Принципы [ править | править код ]

Разработаны различные принципы тестирования, из них два используются наиболее часто: обнаружение антител и выявление белков, характерных для вируса. Результат теста принято называть положительным (вирус обнаружен), отрицательным (вируса нет) или сомнительным (маркеры вируса есть, но не все, результат не может считаться положительным) [4] [5] .

Антитела к ВИЧ [ править | править код ]

По некоторым данным, у 99 % инфицированных антитела обнаруживаются в течение первых 12 недель (6—12 недели) после первичного контакта с вирусом [6] , по другим данным: у 90—95 % антитела к ВИЧ появляются в течение 3-х месяцев после заражения, у 5—9 % — через 6 месяцев, 0,5—1 % — в более поздние сроки [7] ).

Период с ложноотрицательным результатом антител называется «периодом окна». Уже в это время инфицированный человек может быть источником инфекции [8] .

Первыми выявляемыми антителами являются «gag» (англ. group antigen ) белки ВИЧ — р24 и р17, а также прекурсор р55. Образование антител анти-р24 сочетается со снижением уровней свободного антигена р24, выявляемого в крови до появления антител [9] [10] . Вслед за антителами анти-р24 появляются антитела против белков «Env» (англ. Envelope ) — gp160, gp120, p88, gp41 и гена «pol» (англ. Polymerase ) — p31, p51, p66. Могут определяться также и антитела против генов «vpr», «vpu», «vif», «rev», «tat», «nef» [11] [12] .

Наиболее изученными антителами являются антитела, направленные против белков «Env» — gp120, gp41. Они разделяются на два класса: тип-специфичные и групп-специфичные. Другая группа антител анти-gp120, участвующая в антител-зависимом цитотоксическом действии (англ. ADCC ) и уничтожении инфицированных ВИЧ-клеток CD4+, может уничтожать и неинфицированные клетки, рецепторы которых связаны свободным gp120, циркулирующим в крови — эффект, названный «Innocent bystanders» («Bystander killing») [13] [14] .

Тест-системы, определяющие иммунный ответ [ править | править код ]

Предварительным тестом на ВИЧ является ИФА, определяющий наличие в крови антител, которые вырабатывает организм для борьбы с вирусом. Этот тест обладает высокой надёжностью (около 90 %) и селективностью, хорошо отработанная технология сделала этот тест недорогим (себестоимость около 1 долл. США). Для анализа берётся небольшое количество крови из вены [15] .

Существуют также экспресс-тесты для анализа слюны и мочи, которые позволяют проводить тестирование без укола [16] . В России утверждён единственный тест на слюну (околодесенная жидкость) производства США. На родине производителя он прошёл испытания и получил сертификат FDA. В России его испытаниями занимался ГИСК Им. Л. А. Тарасевича в 2009 году [17] .

Выработка антител начинается в организме примерно в течение первого месяца после попадания вируса, затем их количество постепенно растёт. Спустя еще два-два с половиной месяца вырабатывается достаточная концентрация антител для надёжного определения. Поэтому во многих странах (в том числе и в России) перед тестированием пациента предупреждают, что достоверный результат определяется спустя 3—6 месяцев после контакта с вирусом (ок. 90—95 % людей спустя 3—4 месяца, 5—9 % людей спустя 6 месяцев, 0,5—1 % людей гораздо дольше).

Если ИФА показал положительный результат, его перепроверяют с помощью более точного теста иммуноблот. Этот тест имеет очень высокую чувствительность и достоверность (99,9 %), но иногда выдаёт ложноположительные срабатывания. Диагноз «ВИЧ-инфекция» ставится лишь при наличии двух положительных результатов одновременно: ИФА и Вестерн-блот (иммуноблоттинг) [15] .

Тест-системы, определяющие ДНК вируса [ править | править код ]

Самым распространённым из этой группы является тест под названием ПЦР (полимеразная цепная реакция). Обладает меньшей точностью (ок. 85 %), чем ИФА, однако может быть использован уже спустя 10 дней после возможной передачи вируса. Применяется в случаях, когда желателен ранний предварительный результат (до истечения 3 месяцев) или иммунный ответ не может служить показателем: у новорождённых, у пациентов, проходивших иммуносупрессорную терапию (отключение иммунного ответа). По результатам ПЦР диагноз не ставится [18] .

Новый тест TZA [ править | править код ]

Сотрудники Питтсбургского университета (University of Pittsburgh) разработали новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов [19] . Ведущий автор исследования Фалгуни Гупта (Phalguni Gupta) сообщил, что этот тест будет эффективнее и дешевле существующих методов диагностики ВИЧ. Тест назвали TZA – он делается быстрее и крови для него требуется меньше. Принцип действия TZA – поиск гена, который активируется только при репликации вируса. По результатам теста было установлено, что у пациентов, у которых ВИЧ никак себя не проявлял в результате антиретровирусной терапии, резервуары вируса значительно больше – примерно в 70 раз. Однако новый тест не заменит предыдущий полностью, поскольку у Q-VOA и TZA разный механизм действия, и в зависимости от конкретного случая нужно применять подходящий тест [20] .

Достоверность результатов анализа [ править | править код ]

Сомнительным (или неопределённым) результат выявляется в случае, если результат невозможно трактовать как однозначное наличие вируса (например, присутствия в сыворотке крови антител, перекрёстно реагирующих с белками ВИЧ). В таком случае часто рекомендуют пересдать тест через несколько недель или применить более специфические тест-системы.

Ложноположительным результатом называется ситуация, в которой вируса нет, а тест показал положительный результат. Это возможно для теста по методу ИФА, последующая проверка с помощью другой системы подтверждает отсутствие вируса [21] .

Ложноотрицательный результат — отрицательный показатель теста при том, что вирус присутствует. Такая ситуация может сложиться, если анализ проводится слишком рано, до истечения 3 месяцев (недостаточно антител в крови для срабатывания) [21] . Отрицательный результат даёт и анализ ПЦР во время проведения терапии против ВИЧ [22] , когда концентрация вирусов в крови становится ничтожной, ниже порога срабатывания.

СПИД [ править | править код ]

При помощи анализа наличия антигенов вируса или антител к белкам вируса невозможно установить стадию заболевания, определить, находится пациент в терминальной стадии (СПИД) или болезнь находится на более ранней стадии. Тест на ВИЧ лишь показывает наличие вируса или антител к вирусу в организме. Стадия приобретённого иммуного дефицита диагностируется при наличии как минимум двух ассоциированных оппортунистических заболеваний [23] .

Социальные аспекты и юридические нормы [ править | править код ]

Тестирование на ВИЧ очень важно с точки зрения сохранения здоровья человека [24] . Результаты могут повлиять на планирование жизни и карьеры, отношение к собственному организму, сексуальные практики и точку зрения на употребление вредных или опасных субстанций. Вместе с тем результат может стать известен окружающим, а значит, служить причиной для дискриминации [25] : увольнения с работы, развода с супругом, потери близкого человека или друзей, отказа в предоставлении медицинской помощи или других услуг. Часто получение положительного результата теста приводит к сильному стрессу у самого человека. Поэтому решение о тестировании должно приниматься осознанно, без давления и на полностью добровольной основе.

В настоящее время тест доступен в большинстве российских городов. Как правило, тест по желанию пациента можно сделать анонимно и бесплатно. Документы требуются, если пациенту нужна справка с результатом на его имя. Забор крови делают в районных кожно-венерологических диспансерах (КВД), городских СПИД-центрах (организованных во всех городах уровня районного и областного центра) и многочисленных коммерческих лабораториях [26] .

Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан от 22 июля 1993 года № 5487-1 устанавливают [27] , что для любого медицинского вмешательства необходимо информированное добровольное согласие пациента. Это, в частности, означает, что забор крови не может быть на законных основаниях произведён принудительно. Исключение сделано для пациентов, чьё состояние здоровья не позволяет им выразить свою волю (в этом случае решение принимает медицинский консилиум), и для подростков младше 15 лет (решение принимают законные представители).

Принудительное тестирование каких бы то ни было групп населения бесперспективно с точки зрения сдерживания эпидемии [ источник не указан 239 дней ] и противоречит соблюдению прав человека. Проведение теста без согласия человека является незаконным в России. Существуют также 4 ситуации, в которых предоставление результатов тестирования на ВИЧ является обязательным (но не насильственным — каждый может просто отказаться от участия [28] :

1. Донорство крови, других биологических жидкостей и органов.
2. При устройстве на работу медицинского работника или другого специалиста в учреждение, которое непосредственно обрабатывает или принимает материалы, заведомо содержащие ВИЧ.
3. Для иностранных граждан — получение виз для проживания на территории России сроком более 3 месяцев.
4. Тестирование лиц, находящихся в местах лишения свободы в случае наличия клинических показаний (и в этом случае обследование может быть проведено только с согласия пациента).

Экспресс-тесты сейчас используют повсеместно. Например, при экстренном поступлении тяжёлого пациента на пункт неотложной помощи, либо при массовом донорском заборе крови. Тест на ВИЧ проводят женщинам, поступающим в родильное либо гинекологическое отделение без медицинских документов.

В ситуации, когда нужно узнать, заражен ли человек вирусом иммунодефицита, проводится экспресс-анализ на ВИЧ. Для проведения процедуры можно использовать капиллярную кровь (из пальца), слюну или мочу. Итог анализа получают через 10-30 минут после соединения биоматериала с реагентом. Изобретение такого метода позволило получать быстрые результаты, не ожидая выводов лабораторной диагностики, проведение которой занимает 2-3 месяца.

В рамках профилактики развития ВИЧ-инфекции во многих городах работают мобильные пункты тестирования, цель работы которых – услуги по проверке ВИЧ-статуса человека. Процедура проводится анонимно, результат выдают на руки пациенту. Во время ожидания врач проводит профилактическую беседу, предупреждает пациента, что нужно будет пересдать анализ другим методом для уточнения диагноза.

Экспресс метод анализа ВИЧ и его преимущества

Изобретение экспресс-тестов существенно облегчило ВИЧ-диагностику. До недавнего времени присутствие вируса определяли только при исследовании венозной крови. Результат получали через 2-3 месяца после забора крови. За это время вирус размножался, поражая иммунную систему инфицированного человека.

Так как методика быстрого диагностирования появилась сравнительно недавно, закономерно возникают вопросы, как сдать этот тест, сколько делается тест на ВИЧ, когда нужно сдавать анализы, сохраняется ли анонимность итогов исследования, каковы условия проведения экспресс-анализа крови.

Если возникает подозрение на заражение вирусом иммунодефицита, нужно срочно провести экспресс-тестирование на наличие инфекции.

Такие проверки проводят:

• мобильные лаборатории (гарантия полной стерильности и анонимности);
• поликлиники и медицинские пункты (гарантия стерильности и анонимности, но о ВИЧ-статусе будет пометка в медицинской карте);
• в домашних условиях.

ВАЖНО! Инкубационный период инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита, длится около 12 недель. В это время лабораторные исследования не могут выявить присутствие инфекции. Но риск заражения от такого человека очень высок; инфицированный заражает других людей, даже не зная об этом.

Экспресс-анализ ВИЧ позволяет выявлять вирус быстро, но достоверность результата нужно проверять другими методами.

Для анализа используются биологические жидкости:

1. Артериальная (капиллярная) кровь (из пальца).
2. Венозная кровь (количество крови для забора составляет 1-2 мл, такие анализы крови проводят только врачи).
3. Сыворотка крови (исследование проводится в специализированных медучреждениях).
4. Экспресс-тест на ВИЧ по слюне (берут соскоб с верхней и нижней десны).
5. Моча (для анализа берут порцию утренней, концентрированной урины).

Важно знать! Системы экспресс-контроля для определения ВИЧ в слюне появились недавно, но благодаря безболезненности и простоте популярность их быстро выросла.

Метод быстрого выявления вируса иммунодефицита имеет три преимущества: анонимность, доступность и скорость получения результата.

• Сохраняется полная анонимность, так как процедуру можно провести в домашних условиях, где результат будет знать только сам тестируемый. Анонимна и экспресс-проверка, которую проводят в пунктах мобильного тестирования.
• Любая аптека предлагает широкий выбор экстренных систем для выявления этой инфекции. Такая доступность позволяет человеку провести диагностику сразу же, при возникновении подозрения о заражении вирусом. Стоимость набора невысока, так что он доступен для всех социальных слоёв населения.
• Ещё один плюс – скорость выполнения анализа. После проведения всех процедур, описанных в инструкции, до получения результата проходит максимум 30 минут.

Поколения экспресс-тестов

Для определения инфекции иммунодефицита существует четыре поколения тестов:

• Первое поколение — реагенты имели низкую чувствительность и могли определить только антитела к вирусу 1 (выявление антител в крови было возможно через 63 суток после заражения).
• Второе поколение — химикаты имели большую чувствительность, но уже к антителам ВИЧ 1 и ВИЧ 2 (выявление антител через 42 суток).

Анализы этих двух поколений называют лизатными ( использовался обработанный ультразвуком вирус). Их применение считалось условно опасным, так как сопровождалось возможностью инфицирования лаборанта.

• Третье поколение — появилась возможность выявлять различные иммуноглобулины (классов G и M), диагностировать болезнь на более ранних стадиях.
• Тест-системы четвёртого поколения, комбинированные, позволяют выявить как антитела, так и антигены).

Самый распространённый быстрый тест на ВИЧ, которым пользуются в лабораториях и больницах, это «Ретрочек ВИЧ» (производство Индии). Это продукт четвёртого поколения, который дает высокую точность результата, а его цена сравнительно небольшая.

Во время массовых профилактических обследований применяют проверку на ВИЧ средствами четвёртого поколения. Это способствует раннему выявлению инфекции у человека, дает возможность вовремя начать курс лечения и не дать болезни перейти в следующую, смертельную, стадию – синдром приобретённого иммунодефицита (СПИД).

Каковы отличия 3 и 4 поколения тестов

Тесты третьего и четвёртого выпуска содержат искусственно синтезированные пептидные белки ВИЧ, тогда как в тестах предыдущих двух выпусков использовали вирус, обработанный ультразвуком. Тест третьего поколения различал антитела разных классов: иммуноглобулины M, G. Проверка четвёртого поколения выявляет не только антитела, но и антиген (вирус иммунодефицита). Для экспресс-анализа на ВИЧ врачи рекомендуют исследовать кровь, так как только в ней присутствуют антитела и антиген. Исследование слюны в тестах этого поколения даёт результат с меньшей точностью.

Точность и чувствительность тестов 4 -го поколения

Для скрининга на вирус иммунодефицита сейчас применяют тесты 4 поколения с высокой чувствительностью и точностью. Сроки «окна» ожидания при этом сдвигаются в меньшую сторону (для тестов предыдущих поколений «окно» составляло период от 12 и более недель, сейчас – от 4-х до 12 недель). Экспресс-системы 4 – го поколения выявляют антиген на стадии распространения вируса, ещё до момента массового появления антител.

Какие можно получить результаты при проведении тестирования

На консультациях у пациентов возникает множество вопросов об экспресс-исследованиях.

1. «Тестирование на ВИЧ всегда даёт правильный на сто процентов результат?» – результат любого тестированияможет быть ошибочным. Поэтому процедура проводится в два этапа: выполнение экспресс-теста; подтверждение или опровержение возможных результатов расширенным лабораторным анализом.
2. «Когда результатом является ложноположительный тест?» – ложноположительный результат может возникать при беременности (особенно в период острого токсикоза), после перенесённых болезней воспалительного характера, при наличии онкологических новообразований и при аутоиммунных заболеваниях.
3. «Через какой промежуток времени необходимо сделать повторное исследование?» – оптимальный срок для уточнения диагноза наступает через 3месяца с момента последней проверки. Именно через 3 месяца нужно пересдавать анализ для опровержения или подтверждения точности результатов предыдущего исследования.

Экспресс тест на ВИЧ используется в случае, когда результат надо получить быстро. Такие тесты проводятся как в медицинских учреждениях, так и в домашних условиях и позволяют получить результат в течение 10 — 20 минут. Экспресс анализ на ВИЧ используется для определения антител в крови, моче или слюне обследуемого. Для его проведения не требуется специального оборудования и высокой квалификации персонала. Они просты в использовании и выдают очевидный результат, который должен быть подтвержден стандартными методами тестирования.

Экспресс тесты на ВИЧ применяются в приемных отделениях и лабораториях медицинских учреждений, в отделениях скорой и неотложной помощи, в неотложных случаях при поступлении на роды или операцию не обследованного на ВИЧ лица, у доноров перед сдачей крови, при массовом тестировании в передвижных лабораториях и в домашних условиях — везде, где появляется необходимость срочного тестирования на наличие вирусов в крови. Домашний тест на ВИЧ характеризует простота, анонимность и быстрота получения результата.

При помощи быстрых тестов можно:

• увеличить количество обследуемых лиц,
• выявить инфицированные лица,
• увеличить число учреждений, где существует высокая степень риска заражения ВИЧ у отдельных групп населения.

Для срочного тестирования на ВИЧ в медицинские учреждения в РФ закупается только качественная продукция.

Рис. 1. Профессиональный тест Determine HIV Combo, производится в Японии. Лучший в медицине тест четвертого поколения, не имеет аналогов. Позволяет одномоментно определить наличие в крови или сыворотке больного антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и антиген р24 на ранней стадии заболевания (в период серонегативного окна), что способствует снижению распространения инфекции. Используется в медицинских учреждениях.

Принцип работы экспресс-тестов

Новейшие экспресс тесты на ВИЧ работают по принципу иммунохроматографии. Их основным компонентом является узкая бумажная или пластиковая хроматографическая пластинка, на кончик которой наносится проба (цельная кровь, сыворотка или слюна). Исследуемый материал быстро диффундирует (распространяется) вдоль пластины, которая пропитана необходимыми реагентами. При наличии антител к вирусам на пластине появляется окрашенная полоска. При проведении некоторых экспресс анализов на ВИЧ в качестве реагента используется не один, а два антигена (принцип сэндвича). Результат получается в течение 2 — 10 минут. Тесты хранятся при температуре от 15 о С до 30 о С, легко транспортируются.

Рис. 2. Новейшие экспресс тесты на ВИЧ работают по принципу иммунохроматографии. Их основным компонентом является узкая бумажная или пластиковая хроматографическая пластинка, на кончик которой наносится проба (цельная кровь, сыворотка или слюна).

Что такое простые тесты

Работа простых тестов основана на реакции агглютинации, они не требуют специального лабораторного оборудования, достаточно чувствительны и дешевы, проводятся с минимальными трудозатратами, позволяют получить результат в течение 1,5 — 2 часов. Эритроциты, частицы желатина или латекса, покрытые антигенами ВИЧ, при соприкосновении с сывороткой крови, содержащей антитела к данным вирусам, агглютинируют (выпадают в осадок). При использовании эритроцитов данная методика носит название пассивной гемагглютинации. При использовании латекса — латекс-агглютинацией. Наличие термостата является обязательным условием для проведения простого теста. Комплекты реагентов должны храниться в холодильнике при температуре 2 — 8 о С.

Рис. 3. В ряде городов РФ ежегодно в передвижных лабораториях проводится бесплатное и анонимное тестирование на ВИЧ.

Домашний тест на ВИЧ

Экспресс анализ на ВИЧ можно провести в домашних условиях самостоятельно, придерживаясь прилагаемой инструкции. Разработанные методики являются прекрасным изобретением современной медицины и позволяют каждому следить за состоянием своего здоровья. Простота, анонимность и быстрота получения результата — главные особенности домашнего теста. При применении данного исследования можно в качестве исследуемого образца использовать кровь, мочу или слюну.

Где купить экспресс тест на ВИЧ

Экспресс тест можно приобрести в аптеке или заказать через интернет.

Сколько стоит экспресс тест

Стоимость экспресс теста находится в пределах 200 — 300 рублей.

Отзывы

По отзывам многих пользователей экспресс анализы на ВИЧ являются недорогими и простыми в использовании. Они позволяют получить результат в течение нескольких минут. При возникших сомнениях результат всегда можно повторить.

Экспресс тесты по точности и чувствительности сопоставимы с классическими лабораторными методами диагностики ВИЧ-инфекции.

Рис. 4. При возникших сомнениях результат домашнего теста всегда можно повторить.

Главный недостаток домашних тестов

Основными недостатками домашних тестов на ВИЧ является наличие периода «окна», получение ложноположительных результатов и отсутствие дотестового и послетестового консультирования.

Период «окна» при ВИЧ

Антитела в организме инфицированного человека вырабатываются не сразу. На первых порах ВИЧ-инфекция ничем себя не проявляет. Антитела, наличие которых определяют домашние тесты, появляются в крови в среднем через 10 — 12 недель от момента заражения (от 2-х недель до 6-и месяцев). Этот период получил названия «окна», когда анализы на антитела еще отрицательные, но вирусы интенсивно размножаются, а сам больной является опасным в плане заражения контактных лиц. Любой анализ на ВИЧ проведенный в период «окна» следует повторить через некоторое время.

Раннее проведение экспресс анализа на ВИЧ приводит к получению отрицательных результатов при наличии вирусов в крови исследуемого.

Что такое ложноположительный результат

Ложноположительные результаты значительно чаще (до 5%) появляются при проведении теста в домашних условиях, чем в лабораторных условиях. Они появляются в период «окна» во время беременности, аутоиммунных заболеваниях, аллергии, любого другого инфекционного заболевания, в постпрививочный период, при онкопатологии, сифилисе и даже при употреблении в пищу жирной, острой и кислой пищи.

Отсутствие дотестового консультирования

Дотестовое консультирование специалиста поможет предотвратить рискованное поведение человека при получении положительного результата исследования на ВИЧ-инфекцию (попытка самоубийства) и получить необходимую поддержку.

Экспресс тест на ВИЧ необходимо повторить дважды и в случае получения сомнительного или положительного результата сдать анализ в специализированной лаборатории.

Рис. 5. Для срочного тестирования на ВИЧ в РФ закупается только качественная продукция.

Методика проведения экспресс теста на ВИЧ

• Вскройте пакет и выложите все содержимое на столе.
• Вымойте руки и хорошо осушите палец, который будет прокалываться.
• Тест полоска извлекается только перед тестированием и размещается на строго горизонтальной поверхности.
• Скарификатором прокалывается палец.
• Капля крови вносится в специальный приемник.
• В тестовую зону вносится буферный раствор.
• Результат регистрируется через 15 минут.

Основным условием проведения экспресс анализа на ВИЧ является соблюдение периода его применения — от момента предполагаемого риска должно пройти не менее 10 — 12 недель.

Рис. 6. Забор крови для проведения теста. Скарификатором сделайте прокол на безымянном пальце. Каплю крови внесите в отверстие картриджа.

Рис. 7. В положенную зону внести положенное количество буферного раствора (при этом емкость необходимо удерживать вертикально). Через 15 минут регистрируем результат.